Phenolic profiles of nectar and honey of Quillaja saponaria Mol. (Quillajaceae) as potential chemical markers

Quillaja saponaria Mol. (Quillajaceae) is one of the most important melliferous species in Chile, mainly as a source of monofloral honey. Honey made by A. mellifera presents biological activity against pathogens and antioxidant capacity associated with the presence of phenolic compounds deriving from the nectar, as a result of bee honey foraging. The aim of this study was to identify and quantify the phenolic compounds from the floral nectar of Q. saponaria and the honey made in apiaries in the central zone, and compare the composition of the chromatographic profiles of nectar and honey to known phenolic compounds. The results obtained by HPLC-DAD (high-performance liquid chromatography with diode-array detection) showed a similar profile of phenolic compounds, in which gallic acid, myricetin, rutin, quercetin and naringenin were identified. The phenolic compounds detected could be used as a reference for future studies for determining potential chemical markers of this honey, complementing the present identification of honeys by determining their botanical origin. The identification of bioindicators of the floral origins for honey of this species could provide added value to honey commercialization by certifying the botanical origin of their chemical features and biological attributes.

Obtención de derivados de ácido quillaico a partir de Quillaja saponaria: evaluación de la actividad antiinflamatoria tópica y oral / Obtaining quillaic acid derivatives from Quillaja saponaria: evaluation of topical and oral anti-inflammatory activity

Quillaja saponaria Mol. es una especie nativa de Chile, empleada desde tiempos ancestrales para el tratamiento de artritis y dolores dentales. Desde el punto de vista químico las saponinas del quillay han sido ampliamente estudiadas y actualmente se comercializan extractos de la biomasa de quillay, para elaborar saponinas de diversas calidades empleadas en la industria farmacéutica y alimentaria. Sin embargo, se conoce poco acerca de la química de la sapogenina principal (ácido quillaico), así como de la farmacología de esta sapogenina aislada. Estos argumentos brindaron la oportunidad de llevar a cabo una investigación orientada hacia la modificación hemisintética de este producto natural y el estudio de su actividad antiinflamatoria tópica y oral in vivo. El objetivo general de este trabajo fue obtener el ácido quillaico a partir de un extracto acuoso de Quillaja sapoaniaria Mol. y derivados a partir de la modificación estructural del ácido quillaico; así como evaluar la actividad antiinflamatoria tópica de los compuestos obtenidos. Para ello se emplearon reacciones que implicaron reducciones, oxidaciones y sustituciones de grupos, fundamentalmente en los anillos A, C y D de la molécula de ácido quillaico. Cada uno de los compuestos aislados fue caracterizado estructuralmente mediante técnicas espectroscópicas y espectrofotométricas. Para evaluar la actividad antiinflamatoria in vivo se empleó el ensayo del edema inducido en la oreja de ratón, tras la administración de AA y/o TPA. En ambos ensayos el grupo de animales tratados con las muestras a evaluar estuvo constituido por 8 animales, los que recibieron una dosis única de cada una de las muestras. Se emplearon dosis de los compuestos aislados equimolares a las dosis de los fármacos de referencia, indometacina y nimesulida. Además se desarrollaron dos formulaciones en base a ácido quillaico al 8%, las cuales fueron evaluadas mediante el ensayo antiinflamatorio descrito anteriormente. Conjuntamente con el ácido quillaico se aisló y caracterizó otra genina de este extracto: el ácido fitolacagénico. Se obtuvieron derivados de ácido quillaico modificando principalmente el grupo hidroxilo adicional en el C-16 y en el grupo aldehído presente en el C-4 en lugar de un metilo. Se demostró la actividad anti inflamatoria tópica del ácido quillaico frente a inflamación inducida por TPA y/o AA. La actividad antiinflamatoria fue dosis dependiente frente a AA con un efecto máximo de 92,1 %, comparado con el fármaco de referencia nimesulida. El ácido quillaico también presentó actividad dosis dependiente frente a TPA (62,2%). Ambos efectos son estadísticamente significativos. El extracto de saponinas totales (100 Q) no presentó actividad tópica en la inflamación inducida por TPA. Por el contrario, se puede concluir que hubo un efecto pro-inflamatorio. Frente a AA, el 100Q mostró un efecto de sólo 19,8%. El extracto hidrolizado ( H-100 Q) presentó leve actividad antiinflamatoria frente a AA, así como frente a TPA. El efecto antiinflamatorio fue de 25,0% y 35,7 % para AA y TPA, respectivamente. Sin embargo estos resultados no son estadísticamente significativos. Si bien la crema y el gel al 8% de ácido quillaico presentaron efecto antiinflamatorio éstos son menores que las del compuesto puro en ambos ensayos. En la evaluación de la actividad antiinflamatoria por vía oral, el ácido quillaico no presentó efecto antiinflamatorio. Las modificaciones estructurales realizadas al ácido quillaico disminuyeron el efecto antiinflamatorio. Partiendo de la esterificación del ácido quillaico, los resultados del efecto antiinflamatorio para el éster metil quillaico fueron de 27,3% y 38,4% para AA y TPA, respectivamente. Lo que demuestra que para ejercer el efecto es necesario el ácido carboxílico libre. Para la mayoría de los derivados, la actividad antiinflamatoria frente a TPA fue mayor que frente a AA. Nuestros estudios sugieren que la presencia del grupo aldehído podría ser importante para modular la actividad antiinflamatoria frente a AA, mientras que el grupo carboxilo puede modular la actividad antiinflamatoria frente a TPA. El extracto 100Q obtenido desde la corteza de Quillaja saponaria Mol. es una buena fuente de ácido quillaico, tritepenoide con excelente actividad antiinflamatoria tópica.

In vitro and in vivo effects of Quillaja saponaria on Blastocystis hominis isolates

Blastocystis hominis is a protozoan parasite that inhabits the human intestinal tract. Various epidemiological surveys have recorded 50-60% prevalence in developing countries. Until now, the most commonly recommended drug is metronidazole [MTZ] which can cause undesirable side effects and failures in treatment. To investigate the in vitro and in viva effects of Quillaja saponaria [QS] against clonal cultures of B. hominis and to demonstrate its implemented ultrastructural changes. Two fresh stool isolates of B. hominis were processed for in vitro cultivation using Jones media. In comparison to MTZ, different concentrations of QS were added to assess its lethal dose; QS [500 micro g] was used to assess programmed cell death for both isolates, using transmission electron microscopy [TEM]. Experimental infection of rats was performed to assess QS induced intestinal histopathological changes as compared to treatment with MTZ. With isolate I. QS [1000 micro g/ml] produced a high significant reduction [P